高效液相色谱法的优势
发布时间:2013-11-28
高效液相色谱法与经典液相色谱法相比有哪些优点?
高效液相色谱法(HPLC)是20世纪60年代末至70年代初迅速发展起来的分离分析技术,它是在经典液相色谱的基础上,引入气相色谱的理论,在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,实现了分析速度快、分离效率高和操作自动化,这种柱色谱技术被称做高效液相色谱法。
高效液相色谱法与经典液相色谱法比较具有如下优点。
(1)在分析速度上,高效液相色谱比经典的液相色谱要快数百倍。这是因为经典液相色谱是在常压下靠重力加料,洗脱速度很慢,通常分离一个组分需要几小时,甚至几天,而高效液相色谱采用高压泵输液,流动相流速较高,个别可高达100mL/min以上,分析时间大大缩短。
(2)在分离效率上,高效液相色谱法比经典液相色谱法要高得多。经典液相色谱法,通常采用粒度较粗(100um)的固定相做填料,柱效率较低,而高效液相色谱法采用均匀的微颗粒(3~50um)做固定相,理论塔板数最高可达10万/m。
(3)在样品检测上,高效液相色谱仪使用了新型的检测器,检测灵敏度大大提高,自动化程度也日趋完备。另外,经典的液相色谱柱一般只用一次。用后,其中的固定相即弃去,既费人力,又费物力,而高效液相色谱则使用密闭的、可重复使用的色谱柱,进样采用注射器和进样阀,准确而快速,操作方便,因此高效液相色谱对照品无论是在定性还是定量方面,都比经典的液相色谱有较高的准确性和精密度。
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