差值分光光度法测定废水中微量苯酚
发布时间：2017-09-01
1、实验目的
(1)学会使用UV-2100紫外-可见光谱仪。
(2)掌握差值分光光度法测定废水中微量苯酚的方法。
2、实验原理
酚类化合物在酸、碱溶液中发生不同的离解，其吸收光谱也将发生变化。例如，苯酚在紫外区有两个吸收峰，在酸性或中性溶液中，λmax为210nm和272nm，在碱性溶液中，λmax位移至235nm和288nm。
在紫外分析中，有时利用不同的酸、碱条件下光谱变化的规律，直接对有机化合物进行测定。
废水中含有多种有机杂质，干扰苯酚在紫外区的直接测定。如果将苯酚的中性溶液作为参比溶液，测定苯酚碱性溶液的吸收光谱，利用两种光谱的差值光谱，有可能消除杂质的干扰，实现废水中苯酚含量的直接测定(见图6.4)。这种利用两种溶液中吸收光谱的差异进行测定的方法，称为差值分光光度法。
3、仪器和试剂
仪器：岛津UV-2100紫外-可见分光光度计；
容量瓶：50mL，16个。
试剂：苯酚标准溶液：称取苯酚0.3000g，溶于1L容量瓶，作为苯酚的公用标准溶液。
KOH溶液：1m01・L-1 。
4、实验内容与步骤
(1)配制苯酚的标准系列溶液
将10个50mL容量瓶分成两组，各自编号。按表6.2所示加入各种溶液，再用水稀释至刻度，摇匀，作为苯酚的标准系列溶液。
(2)绘制苯酚的吸收光谱
①任意取上述一组溶液，用1cm吸收池，绘制苯酚中性溶液和苯酚碱性溶液的吸收光谱(分别以去离子水作参比溶液)。
②用苯酚的中性溶液作参比溶液，苯酚碱性溶液作样品溶液，绘制苯酚在碱性溶液中的差值光谱。
(3)测定苯酚两种溶液的光谱差值
从上述绘制的差值光谱中，选择288nm附近最大吸收波长作为测定波长λmax。在UV-2100上固定λmax，然后分组测定苯酚溶液两种光谱的吸光度差值。
(4)未知试样中苯酚含量的测定
将10个50mL容量瓶分成两组，每组5个，分别加入未知样。将其中5个用去离子水稀释，其余5个加入5.OmL KOH溶液，再用去离子水稀释至刻度，分别摇匀。分成3对，用1cm吸收池测定光度差值。
5 、注意事项
(1)在使用本仪器前，应先了解仪器的结构、功能和操作程序。
(2)仪器开机前，确认样品室中样品架和参比架上没有任何物品，并且样品室的盖子是关闭的。
(3)在自检过程和扫描过程中，不要按动任何键．不要任意打开样品室盖子。
(4)切勿将任何样品或溶液溅于仪器上或样品室内，应保持样品室清洁和干燥。
(5)绘制紫外光区或紫外一可见光区吸收光谱时，使用石英吸收池；绘制可见光区吸收光谱时，使用玻璃吸收池。
(6)注意保护吸收池，吸收池的光学面必须清洁干净，不准用手触摸。如果光学面外表面有污物或尘土，可用擦镜纸轻轻拭去。吸收池内部用去离子水冲洗，然后用少量乙醇或丙酮脱水处理，常温放置干燥。
(7)对于易挥发试样，应在吸收池上盖上玻璃片。
6、数据处理
(1)将表6.2中测得的光谱差值，绘制成吸光度一浓度曲线，计算回归方程。
(2)利用所得曲线或回归方程，计算未知样品中苯酚的含量(用m01／L表示)的置信范围(置信度95％)。
(3)计算苯酚在中性溶液(272nm附近)或碱性溶液(288nm附近)中的表观摩尔吸收系数。
参考资料：现代仪器分析实验与技术
